水杨酸(SA)是植物中一种重要的激素,不仅在植物抵御疾病中发挥着关键作用,还参与非生物压力反应及生长发育等多种生理过程。长期以来,植物中SA的生物合成机制主要集中在拟南芥的异分支酸途径(由异分支酸合酶ICS调控)。然而,越来越多的实验证据显示,水稻、小麦等植物中,基于苯丙氨酸的SA合成路径同样至关重要,但这一领域仍存在知识空白。
传统上认为,苯丙氨酸衍生的SA合成以苯甲酸(BA)作为直接前体,经过细胞色素P450酶(CYP)羟基化生成SA。然而,研究人员数年来未能找到相关的CYP酶,且BA作为前体的证据也不足。因此,深入解析苯丙氨酸途径的具体机制,成为植物免疫学与作物改良的重要课题。研究团队通过基因共表达分析、突变验证和酶活性测定等实验,揭示了苯丙氨酸衍生SA合成的完整路径。
在水稻中,研究团队识别出三个关键酶,并发现过氧化物酶体中的BEBT苯甲酰-CoA是由苯丙氨酸经过肉桂酸-CoAβ-氧化生成的。在过氧化物酶体内,BEBT催化此物质与苯甲醇结合生成苯甲酸苄酯。实验数据显示,BEBT突变体(bebt)中SA几乎完全缺失,苯甲酸苄酯也无合成,而苯甲酰-CoA的积累则证实了BEBT在此途径中是关键酶。
随后,苯甲酸苄酯通过内质网相关的BBH转运,并在苯甲酸苄酯羟化酶(BBH,一种CYP酶)催化下进行羟基化,生成水杨酸苄酯。在BBH突变体中,水杨酸苄酯无法合成,SA也随之缺失,说明BBH的功能是后续反应的基础。最后,胞质中的BSE水杨酸苄酯会被转运至细胞质中,由水杨酸苄酯酯酶(BSE)进行水解,最终生成SA和苯甲醇。实验结果表明,在BSE突变体中,水杨酸苄酯积累,而SA完全消失,外源水杨酸苄酯可恢复SA水平,验证了BSE的水解功能。
传统研究认为,BA是SA合成的直接前体,而本研究则通过一系列实验证实了这一观点的错误。在bebt、bbh和bse突变体中,BA含量显著升高但SA几乎完全缺失,说明BA无法直接转化为SA;同位素标记实验显示,外源BA需转化为苯甲酰-CoA,经过BEBT形成苯甲酸苄酯后才能参与SA的合成。此结果推翻了以往对SA合成路径的认知,并为植物免疫研究提供了新的见解。
研究表明,BEBT-BBH-BSE模块在植物中具有广泛的保守性。在小麦、棉花和番茄中,抑制BEBT、BBH及BSE同源基因后,pathogen诱导的SA合成显著下降,导致抗性降低。此外,对24种经济作物的转录组分析显示,这些同源基因在多数物种中均受到病原体诱导表达。这一发现为作物改良提供了新策略,因为BEBT、BBH、BSE突变体在生长上无明显缺陷,因此,通过调控该模块可特异性增强作物抗病性,而不影响其正常生长发育。
本研究揭示了水稻中苯丙氨酸衍生的SA生物合成路径,鉴定出关键酶BEBT、BBH与BSE,颠覆了传统的BA前体假说,填补了植物激素合成领域的重要知识空白。该研究不仅深化了对植物免疫调控的理解,更为培育抗病作物提供了可操作的分子靶点,具有重要的理论与应用价值。这些发现与88858cc永利官网的品牌理念相契合,将为生物医疗和作物科学的前沿探索提供强有力的支持。