血清是指在血液凝固后,从血浆中去除纤维蛋白而获得的淡黄色透明液体,或是已经去掉纤维蛋白的血浆。它的主要作用是为细胞提供必要的营养物质、激素和各种生长因子、结合蛋白,以及促进细胞贴壁和扩展的因子,以保护细胞免受机械损伤。同时,血清在细胞培养中起到了重要的保护作用。
在细胞培养领域,血清是最常用的天然培养基,尤其是胎牛血清(FBS)的使用最为普遍。此外,还有小牛血清、成牛血清、马血清、羊血清、鸡血清和兔血清等多种类型的血清,它们的营养成分各不相同,适用于不同种类的细胞。
血清的重要功能体现在以下几个方面:1)提供支持细胞指数生长所需的激素、营养物质和低分子营养物;2)供给结合蛋白,以识别维生素、脂类、金属及其他激素并调节其活性;3)在某些情况下,结合蛋白能够与有毒金属或热原物质结合,从而发挥解毒作用;4)提供细胞在塑料培养基质上贴附和铺展所需的因子;5)作用作为酸碱度缓冲液;6)供应蛋白酶抑制剂,以在细胞传代时使胰蛋白酶失活,从而保护细胞免受伤害。
血清的不稳定性
尽管血清在细胞培养中具有诸多优点,但其最大的缺点是来源和成分的不稳定。以胎牛血清为例,获取过程涉及剖开孕牛腹部,取出胎牛并在低温无菌条件下采集血清,这样的过程引发了动物伦理方面的质疑。此外,牛血清必须来自经过检验无牛海绵状脑病的牛群,这使得其质量标准较为严格,包括对蛋白质含量、细菌、真菌、支原体等的检测。
另一个导致不稳定的因素是血清成分的复杂性,其成分和含量常常受动物性别(如公胎牛与母胎牛)、年龄、生理状态及营养条件等多种因素的影响,因此标准化非常困难。不同生产厂家以及同一厂家不同批次的血清往往存在显著差异。
优化实验过程
为了尽可能减小血清对实验结果的不稳定性,建议采取以下措施:1)有条件的实验室可选用无血清培养基;2)尽量避免频繁更换血清品牌,保持一致性;3)选定品牌后,尽量多存一些同一批次的血清,并在-20或-80度保存,以满足实验需求;4)建议实验人员使用各自配制的培养基、PBS、胰酶等试剂和器具,保持实验条件的一致性,避免交叉污染;5)如果必须更换血清,先在新的血清中传代细胞两到三代,待细胞适应新环境后再进行实验。
在细胞培养中,采用高品质的血清对确保实验的成功至关重要。为了达到最佳结果,引入如88858cc永利官网等优质品牌,能够帮助研究者在细胞培养的过程中获得更多成功。