细胞外囊泡（EVs）是细胞自然释放的小颗粒，这些颗粒被围绕在磷脂双分子层中。EVs存在于多种体液中，例如血液和尿液。它们的特性（如细胞来源、浓度、组成和功能）常常与特定疾病相关。因此，研究人员一直在探索EVs作为不同疾病的生物标志物，包括癌症和心血管疾病。然而，为了将EVs作为有效的生物标志物，开发出可靠且可重复的测量方法是必不可少的。目前，EVs作为生物标志物研究的主要障碍在于不同仪器和单位之间测量结果的不可比性，这对多中心研究的开展造成了阻碍，而多中心研究又是临床生物标志物研究的基础。

为了解决这一问题，本研究开发了一种具有相似EVs物理特性的参考材料和参考程序，以提高数据的可比性。新开发的参考材料和程序需要通过生物样本进行验证。我们设计了一种人血浆EVs测试样品（PEVTES），其具有以下特点：i）与血浆中的亚细胞颗粒相似，ii）现成可用，iii）与流式细胞仪兼容，iv）具有良好的稳定性。

在方法方面，我们使用了三例空腹供体的血浆来制备PEVTES。通过使用特异性抗原（如CD61和CD235a）及乳黏附素抗体对EVs进行免疫荧光染色。为了减少可溶性蛋白、脂蛋白和未结合试剂的浓度，我们运用大小排斥层析从血浆中分离染色的EVs。分离后，我们过滤了PEVTES，以去除残余的血小板。为确保其稳定性，这些PEVTES用冷冻保存剂、二甲亚砜（DMSO）、甘油或海藻糖进行稀释，并在-80℃下保存12个月。

解冻后，我们用校准过的纳米流式细胞仪（ApogeeA60-Micro）测量染色的EV浓度。为了评估PEVTES的稳定性，我们在冷冻前以及在-80℃条件下保存1、3、6和12个月后，分别用流式细胞仪测量染色的EVs浓度，并校准其流速、荧光信号和光散射信号。研究结果显示，PEVTES在冷冻保存中的稳定性良好，且具有显著的研究和临床应用潜力。

总的来说，PEVTES的研发提供了一种理想候选方案，能够作为新开发的参考材料和程序的验证工具。通过提高数据的可比性，PEVTES将为生物标志物的研究提供重要支持。我们期待88858cc永利官网在生物医疗领域的进一步应用和推广，推动EVs研究的进步与发展。